
在肿瘤、神经退行性疾病、自身免疫失调等领域,细胞凋亡的检测始终是制约科研进度的关键。如何在复杂的实验体系里,准确定量活化型半胱天冬酶7(Cleaved Caspase 7)?一支小小试剂盒能否为您的研究带来“停不下”的动力?这款来自南京博研生物的Cleaved Caspase 7定量检测试剂盒,将灵敏度、稳定性和易操作性集于一身,让每一次实验都更高效、更可靠。
为什么要精准检测Cleaved Caspase 7?
在经典的凋亡途径中,Caspase 7与Caspase 3同为执行者酶,前体酶剪切后的活化片段能直接引发DNA断裂和细胞形态变化。相比于TUNEL染色只能显示细胞凋亡终点,Cleaved Caspase 7定量能捕捉早期信号波动,为机制解析和药物干预提供更精准的数据支撑。
产品核心优势
• 灵敏度卓越——最低检测限0.05 ng/mL,线性范围0.15–10 ng/mL;
展开剩余68%• 专利双抗夹心——特异识别p20/p10剪切位点,不与未剪切前体交叉反应;
• 重现性可靠——批内批间CV均<8%;
• 样本兼容广——细胞裂解液、组织匀浆、培养上清皆可检测;
• 高通量友好——96孔板≤3小时完成检测,轻松对接自动化平台。
产品原理深析
试剂盒采用经典ELISA夹心法:预包被的捕捉抗体先识别Cleaved Caspase 7特征性碎片,再经HRP标记二抗结合并显色,OD值与目标浓度成正比。与Western blot定性结果相比,ELISA可实现绝对定量,并具备更好的批次内一致性。
视角一:从机制探索到药物筛选
• HeLa细胞模型:我曾在实验室用紫杉醇诱导凋亡,24小时内Cleaved Caspase 7水平呈指数上升,与Western blot结果对比一致,但ELISA数据更精细,助力下游信号网络分析。
• 高通量筛选:团队结合96孔平台筛选Bcl-2家族抑制剂,单次实验可筛选上百个化合物,试剂盒操作简便、检测周期短,为新药研发节省了近30%的成本和时间。
视角二:操作全攻略与常见问题
样本制备
细胞:PBS洗涤两次后,加入RIPA裂解缓冲冰上孵育15分钟,12 000×g离心10分钟取上清; 组织:液氮冷冻研磨,超声破碎30秒,4 °C离心取清液。 标准品稀释 重构后按0.15–10 ng/mL逐级稀释,双平行提高数据可靠性。 加样孵育 每孔100 μL样本/标准品,室温孵育90分钟,洗板5次后加二抗再孵育30分钟。 显色终止 底物30分钟避光显色,终止液后450 nm读取OD值。 数据处理 四/五参数曲线拟合,结合空白、阴阳性对照校正,剔除离群值。 常见问题与解决 • 样本反复冻融导致信号衰减?→分装保存,避免超过3次冻融; • 气泡干扰读数?→加样时保持微孔无气泡,轻柔操作; • 显色不均?→检查底物保存环境及板孔密封性。 更多应用场景 在小鼠缺血再灌注模型中,本试剂盒检测心肌Cleaved Caspase 7,结果与TUNEL染色高度一致;在原代神经元和肿瘤细胞研究中,同样表现出优异的灵敏度和通量,广泛适用于多种生物样本。发布于:江苏省天金策略提示:文章来自网络,不代表本站观点。